基于网络药理学和细胞试验探讨荷叶多糖治疗牛子宫内膜炎的作用机制
李蓉;郭利伟;覃美林;【目的】旨在探讨荷叶多糖治疗牛子宫内膜炎的作用靶点及其相关机制,为其开发与应用提供科学依据。【方法】检索文献获得荷叶多糖的主要成分,采用TCMSP数据库、SwissTargetPrediction数据库预测活性成分的作用靶点,并通过UniProt数据库对获取的靶点进行基因标准化。利用GeneCards、OMIM数据库筛选牛子宫内膜炎的疾病相关靶点,将荷叶多糖活性成分作用靶点与疾病靶点取交集,并对交集靶点绘制Venn图。随后,基于STRING数据库构建蛋白互作网络(PPI)进行拓扑分析,使用Cytoscape 3.10.2软件构建“成分-靶点”网络图。随后将配体受体文件导入在线网站CB-Dock2进行分子对接验证,并通过试验验证网络药理学预测结果的可行性。【结果】(1)荷叶多糖的主要化学成分为半乳糖、半乳糖醛酸、阿拉伯糖、鼠李糖、甘露糖、葡萄糖和葡糖醛酸;药物活性成分作用靶点共180个,牛子宫内膜炎相关疾病靶点1 995个,药物与疾病共有靶点69个,其中34个蛋白具有较好的互作能力,通过筛选得到7个核心靶点,包括CASP3、STAT3、FGF2、PPARG、TLR4、IL-1β和IL2。(2)GO功能注释结果发现,交集靶点共得到342个条目,其中生物过程192个条目,涉及序列特异性DNA结合MAPK级联的正向调节、G蛋白偶联谷氨酸受体信号通路、RNA聚合酶Ⅱ对转录的正向调节等;细胞组分45个条目,主要包括细胞质基质、突触后膜、细胞质的核周区域等;分子功能105个条目,主要有信号受体结合、氧化还原酶活性、核受体活性等。(3)KEGG富集分析结果发现,靶点显著富集于神经活性配体-受体相互作用、TRP通道的炎症介质调节、PPAR信号通路、半乳糖代谢以及MAPK信号通路等。(4)分子对接结果表明,荷叶多糖主要活性成分与核心靶点具有良好的结合能。(5)细胞试验验证结果与网络药理学预测结果趋势一致。【结论】荷叶多糖可通过多成分、多靶点、多通路发挥治疗牛子宫内膜炎的作用,其主要成分可能作用于CASP3、STAT3、IL-1β、TLR4、PPARG和FGF2等靶点,调控MAPK、PPAR等信号通路及炎症介质调节过程,抑制炎症反应、调节免疫功能,进而发挥治疗子宫内膜炎的潜力。
山香圆叶总黄酮提取工艺优化及体外协同氨苄西林抗菌的作用研究
马嘉敏;冯语涵;邓雅雯;孟璞岩;李政霖;曹瑞文;曹亮亮;郑展宏;刘平;高晓娜;郭小权;蔡高峰;【目的】旨在优化山香圆叶总黄酮的提取工艺,并评价其与氨苄西林联用对肺炎克雷伯菌、芽孢杆菌、奇异变形杆菌及大肠杆菌的体外抑菌活性,为山香圆叶总黄酮作为畜禽减抗药物的开发提供试验依据。【方法】采用单因素试验、正交设计与响应面法(Box-Behnken)优化山香圆叶总黄酮的提取工艺;通过微量肉汤稀释法测定单药最小抑菌浓度(MIC),棋盘稀释法测定联合抑菌指数(FICI)。【结果】(1)山香圆叶总黄酮最佳提取条件为温度80℃、时间90 min、料液比1∶50、颗粒度100目,提取率达15.83%。(2)4种试验菌株对氨苄西林均表现为耐药(抑菌圈直径≤17.93 mm);山香圆叶总黄酮联合用药后,奇异变形杆菌与肺炎克雷伯菌的FICI均为0.75(相加作用),大肠杆菌FICI=2(无协同作用),芽孢杆菌FICI=1.5(无协同作用)。【结论】响应面法优化的山香圆叶总黄酮提取工艺稳定可靠;山香圆叶总黄酮与氨苄西林联用对奇异变形杆菌和肺炎克雷伯菌具有相加作用,但对大肠杆菌和芽孢杆菌无协同效果,表明其增效作用具有菌株特异性。
一例犬复孔绦虫临床鉴定与遗传进化分析
李晓琼;刘平;李麟;【目的】旨在探讨本地犬复孔绦虫(Dipylidium caninum)临床鉴定、遗传背景及亲缘关系,为完善犬复孔绦虫流行病学资料、制定针对性防控策略提供试验数据与理论支撑。【方法】以一例临床疑似感染犬复孔绦虫的患犬为研究对象,通过患犬剖检、虫体形态学观察、醋酸卡红染色镜检、PCR分子鉴定、基因测序及序列比对分析,结合系统进化树构建,开展虫株遗传进化研究。【结果】(1)剖检可见患犬小肠内聚集大量带状虫体,虫体长14~15 cm,虫体附着处肠黏膜点状出血,肠道充血肿胀。醋酸卡红染色镜检显示,虫体头节为菱形或梨形,具4个半球形吸盘和带棘刺的可伸缩顶突;成熟节片有2套生殖器官,含约150枚睾丸、成对葡萄串状卵巢及后侧条状卵黄腺,双侧各具一处生殖孔。末端长方形孕节含多个储卵袋,虫卵形态均符合犬复孔绦虫特征。(2)PCR扩增线粒体R166基因,获得大小约503 bp的特异性目的条带,与预期的目的片段大小相符;序列比对显示,该虫株与犬复孔绦虫参考序列Dipylidium caninum(NC_021145.1)同源性为99.79%,置信度为99%,进一步证实分离虫株为犬复孔绦虫。【结论】本研究综合剖检、形态学观察与分子生物学方法,确诊患犬为犬复孔绦虫感染,为该病的精准诊断和临床防治提供了可靠技术支持与实践依据。
中药防治母畜卵巢功能减退的研究进展
吴杰;豆晓霞;张森;卵巢功能减退是导致母畜繁殖力下降的重要原因,其发生与氧化损伤、炎症反应及细胞凋亡等机制密切相关。当前兽医临床治疗常用的激素疗法存在干扰母畜自身内分泌,甚至诱发生殖器官疾病等问题。中兽医将本病归属于“月水先闭”“经水早断”等范畴,以“肾虚精亏、阴阳失调”为核心病机。现代研究表明,中药可通过调控PI3K/Akt、Nrf2/ARE、NF-κB等信号通路,抑制卵泡细胞凋亡、减轻氧化应激及炎症反应、促进卵巢血管生成、调节肠道微生物群、激活内源性干细胞,多靶点改善母畜卵巢功能,提高其繁殖性能。本文综述了近10年中药在防治动物卵巢功能减退方面的相关研究,为中药在畜牧业中的开发应用提供参考。
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